文章来源:极手游作者:小狐狸发布时间:2022-11-01 16:11:07
培养基是指为微生物、植物或动物(或组织)的生长和繁殖,通过组合不同的营养物质而制备的营养基质。一般含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水。培养基不仅是提供细胞营养和促进细胞增殖的基本物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。
今天我们来普及一下两种常见媒体(SOB媒体和SOC媒体)的用途和区别。
SOB培养基是分子生物学中大肠杆菌的常用培养基。与LB培养基相比,SOB培养基含有两倍的蛋白胨,富含氨基酸和多肽。此外,SOB培养基含有高密度培养所必需的镁离子。大肠杆菌在常规条件下(250rpm)于摇瓶SOB培养基中培养,细菌浓度可达约OD600 3-5。如果转速提高到350 rpm,最高OD600可以达到10-15。SOB培养基中的大肠杆菌具有较高的转化效率,因此SOB培养基常用于制备感受态细胞。SOB培养基也用于制备SOC培养基。
账套介质的公式如下:
2.0%胰蛋白胨
0.5%酵母提取物(酵母提取物)
10毫米氯化钠
2.5毫米氯化钾(氯化钾)
10毫米氯化镁
10毫米硫酸镁(硫酸镁)
了解了SOB培养基的相关用途和基本制备方法后,我们再来看看SOC培养基的相关知识。
SOC培养基也是分子生物学中常用的培养基,用于高效制备大肠杆菌感受态细胞,也用于热休克后感受态细胞的恢复。
SOC培养基的配方如下:
0%胰胨(胰蛋白胨)
0.5%酵母提取物(酵母提取物)
10毫米氯化钠
2.5毫米氯化钾(氯化钾)
10毫米氯化镁
10毫米硫酸镁(硫酸镁)
20毫米葡萄糖(葡萄糖)
SOC和SOB培养基的唯一区别是SOC含有20 mM葡萄糖。培养基中的葡萄糖充当分解代谢物阻遏物。大肠杆菌更倾向于利用葡萄糖作为碳源。因此,在葡萄糖的存在下,其他碳源的分解会受到抑制。在20 mM葡萄糖存在下,乳糖不会被代谢,乳糖操纵子被抑制,外源基因不会表达,减轻了外源基因表达给细胞带来的生长压力。因此,在使用SOC培养基进行转化反应时,热休克后的细胞生长速度会比在LB培养基中高得多。
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